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上海通蔚生物關于小鼠elisa試劑盒的原理
日期:2025-12-05 20:00
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摘要:上海通蔚生物科技有限公司位于直轄市之一的上海,且依托上海張江高科生物研究優勢,已發展成集科研、生產、銷售為一體性科研企業。我們有好的產品和專業的團隊。公司發展迅速,我們為客戶提供科研產品、良好的技術支持、健全的售后服務。
核心原理:雙抗體夾心法(常用)
小鼠 ELISA 試劑盒主流的技術路線是雙抗體夾心法,整個過程可拆解為 4 個關鍵步驟,確保檢測的特異性和靈敏度。
包被(Coating):將針對目標抗原的捕獲抗體固定在酶標板的微孔內壁上。這一步能確保后續只結合樣本中的特定抗原,排除其他雜質干擾。
加樣與結合(Binding):向微孔中加入待檢測的小鼠樣本(如血清、細胞上清)。樣本中的目標抗原會與微孔壁上的捕獲抗體特異性結合,形成 “抗體 - 抗原” 復合物。
加檢測抗體(Detection):加入帶有酶標記(如辣根過氧化物酶 HRP、堿性磷酸酶 AP)的檢測抗體。該抗體同樣能與目標抗原結合,形成 “捕獲抗體 - 抗原 - 酶標檢測抗體” 的三明治結構。
酶促顯色與讀數(Coloration & Reading):加入與酶對應的底物(如 TMB、OPD)。酶會催化底物發生化學反應,產生顏色變化(通常為藍色或黃色)。目標抗原濃度越高,結合的酶標抗體越多,顏色越深。通過酶標儀讀取吸光度值,對照標準曲線即可計算出樣本中目標抗原的具體濃度。
關鍵優勢
特異性高:依賴抗原與抗體的特異性結合,能精準識別目標物質,減少交叉反應。
靈敏度高:酶促反應可將微弱的抗原 - 抗體結合信號放大,能檢測到納克(ng)甚至皮克(pg)級別的物質。
小鼠 ELISA 試劑盒主流的技術路線是雙抗體夾心法,整個過程可拆解為 4 個關鍵步驟,確保檢測的特異性和靈敏度。
包被(Coating):將針對目標抗原的捕獲抗體固定在酶標板的微孔內壁上。這一步能確保后續只結合樣本中的特定抗原,排除其他雜質干擾。
加樣與結合(Binding):向微孔中加入待檢測的小鼠樣本(如血清、細胞上清)。樣本中的目標抗原會與微孔壁上的捕獲抗體特異性結合,形成 “抗體 - 抗原” 復合物。
加檢測抗體(Detection):加入帶有酶標記(如辣根過氧化物酶 HRP、堿性磷酸酶 AP)的檢測抗體。該抗體同樣能與目標抗原結合,形成 “捕獲抗體 - 抗原 - 酶標檢測抗體” 的三明治結構。
酶促顯色與讀數(Coloration & Reading):加入與酶對應的底物(如 TMB、OPD)。酶會催化底物發生化學反應,產生顏色變化(通常為藍色或黃色)。目標抗原濃度越高,結合的酶標抗體越多,顏色越深。通過酶標儀讀取吸光度值,對照標準曲線即可計算出樣本中目標抗原的具體濃度。
關鍵優勢
特異性高:依賴抗原與抗體的特異性結合,能精準識別目標物質,減少交叉反應。
靈敏度高:酶促反應可將微弱的抗原 - 抗體結合信號放大,能檢測到納克(ng)甚至皮克(pg)級別的物質。
操作便捷:步驟標準化,無需復雜儀器,普通實驗室即可完成,且可同時檢測多個樣本(高通量)。